Les passages cellulaires doivent-ils être pré-mouillés avant utilisation? C'est une question qui se pose souvent en laboratoire, et en tant que fournisseur de passoire cellulaire, je suis fréquemment interrogé sur les meilleures pratiques pour utiliser nos produits. Dans ce billet de blog, je vais me plonger dans le sujet, explorant les raisons de la pré-mouillance des cellules, les inconvénients potentiels et la fourniture de conseils pour savoir s'il est nécessaire pour différentes applications.
La science derrière les passages de cellules pré-mouillants
Les vifilles cellulaires sont couramment utilisées dans la culture cellulaire et la dissociation tissulaire pour séparer les cellules des débris, des touffes et des particules plus grandes. Ils sont disponibles dans diverses tailles de pores, commeVérisseur de cellules 40UM,Vérisseur à cellules 70, etVérinue de cellules 100um, pour répondre à différents types de cellules et exigences expérimentales.
La principale raison des crépines cellulaires pré-mouillants est de réduire la tension superficielle du maillage. Lorsqu'une passoire à cellules sèches est utilisée, la tension en surface du maillage peut faire en sorte que les cellules l'entraînent, conduisant à une perte de cellules et à un comptage cellulaire inexact. En pré-mouillant la crépine avec un tampon ou un milieu approprié, la tension de surface est réduite, permettant aux cellules de passer plus facilement dans le maillage.
Un autre avantage du pré-mouillage est qu'il aide à éliminer les débris ou les contaminants qui peuvent être présents sur le maillage. Pendant le processus de fabrication, les petites particules ou les fibres peuvent être piégées dans le maillage, ce qui peut interférer avec le processus de filtration. Pré - mouiller la passoire avec un flux doux de tampon ou de milieu peut laver ces contaminants, assurant une filtration propre et efficace.
Lorsque le pré-mouillage est nécessaire
Dans de nombreux cas, les crépines cellulaires pré-mouillants sont fortement recommandées. Par exemple, lorsque vous travaillez avec des types de cellules délicates, telles que les cellules primaires ou les cellules souches, le pré-mouillage peut améliorer considérablement la récupération des cellules. Ces cellules sont souvent plus fragiles et sujets aux dommages, et la réduction de la tension de surface du maillage peut minimiser la contrainte sur les cellules pendant la filtration.
Le pré-mouillage est également nécessaire lors de l'exécution du tri des cellules ou de la cytométrie en flux. Dans ces applications, le comptage et l'analyse des cellules précises sont cruciaux. En pré-mouillant la crépine, vous pouvez vous assurer que les cellules sont réparties uniformément et qu'il n'y a pas de perte de cellule due au collage. Ceci est particulièrement important lorsque vous travaillez avec des populations de cellules abondantes faibles, où chaque cellule compte.
Lorsque vous travaillez avec des échantillons visqueux, tels que les homogénats tissulaires ou les suspensions cellulaires avec une concentration élevée en protéines, le pré-mouillage peut également être bénéfique. Les échantillons visqueux ont tendance à obstruer le maillage plus facilement, et le pré-mouillage peut aider à prévenir cela en réduisant l'adhésion de l'échantillon au maillage.
Lorsque la pré-mouillage peut ne pas être nécessaire
Cependant, il y a certaines situations où les crépines cellulaires pré-mouillantes peuvent ne pas être nécessaires. Par exemple, lorsque vous travaillez avec des lignées cellulaires robustes qui sont moins sensibles à la contrainte mécanique, telles que les lignées cellulaires immortalisées, le pré-mouillage peut ne pas être essentiel. Ces cellules sont généralement plus résistantes aux dommages et la tension de surface du maillage peut ne pas avoir un impact significatif sur la récupération des cellules.
De plus, si le protocole expérimental ne nécessite pas un niveau élevé de récupération des cellules ou si les cellules sont utilisées pour une analyse qualitative plutôt que quantitative, un pré-mouillage peut ne pas être nécessaire. Par exemple, si vous utilisez simplement la crépine cellulaire pour éliminer les gros débris d'une suspension cellulaire et que vous n'avez pas besoin de compter avec précision les cellules, le pré-mouillage peut être ignoré pour gagner du temps.
Comment pré-Veurs à cellules humides
Si vous décidez de pré-mouiller vos crépines cellulaires, le processus est relativement simple. Tout d'abord, choisissez un tampon ou un milieu approprié compatible avec vos cellules et votre protocole expérimental. Les tampons couramment utilisés comprennent une solution saline tamponnée au phosphate (PBS), une solution saline équilibrée de Hank (HBSS) ou un milieu de culture cellulaire.
Pour pré - mouiller la passoire, placez-la dans un support ou entonnoir approprié et ajoutez lentement une petite quantité de tampon ou de milieu au centre du maillage. Utilisez une pipette ou une seringue pour appliquer doucement le liquide, en vous assurant que le maillage entier est couvert. Laissez le tampon ou le milieu tremper dans le maillage pendant quelques secondes, puis appuyez doucement sur la crépine pour éliminer les bulles d'air.
Après la pré-mouillage, la passoire est prête à l'emploi. Vous pouvez ensuite ajouter votre suspension cellulaire au centre du maillage et lui permettre de filtrer. Si nécessaire, vous pouvez utiliser un flux doux de tampon ou de milieu pour aider les cellules à traverser le maillage.
Meilleures pratiques pour la pré-mouillage
Lorsque les crépines cellulaires pré-mouillant, il est important de suivre certaines meilleures pratiques pour assurer des résultats optimaux. Tout d'abord, utilisez un tampon propre et stérile ou moyen pour pré-mouiller la passoire. Les tampons contaminés peuvent introduire des bactéries ou des champignons indésirables dans l'échantillon, ce qui peut compromettre l'intégrité de l'expérience.
Deuxièmement, utilisez un flux doux de tampon ou moyen pour pré-mouiller la passoire. Évitez d'utiliser un flux de pression élevé, car cela peut endommager le maillage et faire forcé trop rapidement les cellules, entraînant une perte de cellule.
Enfin, assurez-vous de pré-mouiller la passoire immédiatement avant l'utilisation. Si la passoire est pré-humide puis laissée à sécher, la tension en surface du maillage augmentera à nouveau, annulant les avantages du pré-mouillage.
Conclusion
En conclusion, la question de savoir si les crépines cellulaires doivent être pré-humides avant utilisation dépend de plusieurs facteurs, notamment le type de cellule, le protocole expérimental et le niveau de récupération des cellules souhaité. Dans la plupart des cas, le pré-mouillage est fortement recommandé, car il peut améliorer la récupération des cellules, réduire la perte de cellules et assurer une filtration propre et efficace. Cependant, dans certaines situations, le pré-mouillage peut ne pas être nécessaire.
En tant que fournisseur de crépine cellulaire, nous nous engageons à fournir des produits de haute qualité et un support technique à nos clients. Si vous avez des questions sur l'utilisation de nos crépines cellulaires ou si vous avez besoin de conseils supplémentaires sur la pré-mouillage, n'hésitez pas à nous contacter. Nous pouvons vous aider à déterminer la meilleure approche pour votre application spécifique et à vous assurer d'obtenir les meilleurs résultats possibles.
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Références
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- Johnson, A. et al. "Optimisation de la filtration cellulaire: le rôle du pré-mouillage." Lettres de biotechnologie, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Brown, C. et al. "Utilisation de la passoire cellulaire: meilleures pratiques et considérations." Journal de biologie expérimentale, 20xx, xx (xx), xx - xx.